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021-65232515
狗臟器組織白細(xì)胞分離液說(shuō)明書
(細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué))
【產(chǎn)品規(guī)格】
200ml/Kit
貨號(hào):WBC1079P
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
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 | 名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 
 | 規(guī)格 | 
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 | A | 狗臟器組織白細(xì)胞分離液 | 
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 | 200ml | 
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 | B | 樣本稀釋液(贈(zèng)品) | 2010C1119 | 
 | 200ml | 
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 | C | 清洗液(贈(zèng)品) | 
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 | 2010X1118 | 
 | 200ml | 
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 | D | F 液(贈(zèng)品) | 
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 | F2013TBD | 
 | 200ml | 
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 | E | 紅細(xì)胞裂解液(贈(zèng)品) | NH4CL2009 | 
 | 100ml | 
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 | F | 說(shuō)明書 | 
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 | 1 份 | 
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| 【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】 | 
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| A. 適用儀器 | 
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 | zui大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī) | 
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| B. 耗材 | 
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 | 產(chǎn)品名稱 | 
 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 
 | 產(chǎn)地 | 
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 | 15ml 離心管散裝 | 
 | 339650 | 
 | 美國(guó) NUNC | 
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 | 15ml 離心管架裝 | 
 | 339651 | 
 | 美國(guó) NUNC | 
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 | 50ml 離心管散裝 | 
 | 339652 | 
 | 美國(guó) NUNC | 
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 | 50ml 離心管架裝 | 
 | 339653 | 
 | 美國(guó) NUNC | 
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 | 無(wú)菌膠頭滴管或塑料滴管 | 
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| 【檢驗(yàn)方法】 | 
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全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
【注意事項(xiàng)】
【儲(chǔ)存條件及有效期】
18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)白細(xì)胞提取率及純度大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
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 | 紅細(xì)胞 | 
 | 白細(xì)胞 | 
 | 血小板 | 
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 | (4.0-10.0)×109 | 
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| 含量(個(gè)/L) | (4.0-5.5)×1012 | 中性粒細(xì)胞 | 淋巴細(xì)胞 | 單核細(xì)胞 | (1.0-3.0)×1011 | 
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 | 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | 
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【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
1. 組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)
D.PCR 技術(shù)
注:上述技術(shù)方案詳情請(qǐng)登陸本公司搜索“細(xì)胞分離、
純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊(cè)”,并在說(shuō)明書項(xiàng)目欄下下載使用。
【可能存在的問(wèn)題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問(wèn)題及解決方案如下表所示:
| 出現(xiàn)情況 | 出現(xiàn)原因 | 建議解決方案 | 
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| 離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 | 轉(zhuǎn)速過(guò)小或離心時(shí)間過(guò)短 | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 | 
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| 離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 | 轉(zhuǎn)速過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng) | |
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| 離心后白環(huán)層彌散 | 細(xì)胞密度過(guò)大 | 調(diào)整細(xì)胞密度 | 
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| 離心后白環(huán)層太淺或看不見 | 細(xì)胞密度過(guò)小 | |
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能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達(dá)到*分離效果,
離心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。
