您好,歡迎來到上海研謹(jǐn)生物科技有限公司!

13585717991
021-65232515
豚鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒說明書
【產(chǎn)品規(guī)格】
200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
  | 名稱  | 產(chǎn)品編號  | 規(guī)格  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
A  | 豚鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液  | 
  | 200ml  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
B  | 樣本稀釋液(贈品)  | 2010C1119  | 200ml  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
C  | 清洗液(贈品)  | 2010X1118  | 200ml  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
D  | 說明書  | 
  | 1 份  | 
  | 
  | 
  | 
  | 

 
豚鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
A. 適用儀器
zui大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
B. 耗材
  | 產(chǎn)品名稱  | 產(chǎn)品貨號  | 產(chǎn)地  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 15ml 離心管散裝  | 339650  | 美國 NUNC  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 15ml 離心管架裝  | 339651  | 美國 NUNC  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 50ml 離心管散裝  | 339652  | 美國 NUNC  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 50ml 離心管架裝  | 339653  | 美國 NUNC  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 無菌膠頭滴管或塑料滴管  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
【檢驗(yàn)方法】  | 
  | 
  | |
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例與樣本稀釋液(產(chǎn)品編號:2010C1119)混勻,根據(jù)
稀釋后的樣本量大小,分以下兩種情況:
情況 A:稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時,實(shí)驗(yàn)方法如下:
情況 B:稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時,實(shí)驗(yàn)方法如下:
【注意事項(xiàng)】豚鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液
【儲存條件及有效期】
18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)淋巴細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
  | 紅細(xì)胞  | 
  | 白細(xì)胞  | 
  | 血小板  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | (4.0-10.0)×109  | 
  | ||
含量(個/L)  | (4.0-5.5)×1012  | 中性粒細(xì)胞  | 淋巴細(xì)胞  | 單核細(xì)胞  | (1.0-3.0)×1011  | 
  | 
  | 50%-70%  | 20%-40%  | 3%-8%  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
  | 
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
D.PCR 技術(shù)
注:上述技術(shù)方案詳情請登陸本公司搜索“細(xì)胞分離、
純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊”.
【可能存在的問題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
出現(xiàn)情況  | 出現(xiàn)原因  | 建議解決方案  | 
  | 
  | 
  | 
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層  | 轉(zhuǎn)速過小或離心時間過短  | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速  | 
  | 
  | |
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中  | 轉(zhuǎn)速過大或離心時間過長  | |
  | ||
  | 
  | 
  | 
離心后白環(huán)層彌散  | 細(xì)胞密度過大  | 調(diào)整細(xì)胞密度  | 
  | 
  | |
離心后白環(huán)層太淺或看不見  | 細(xì)胞密度過小  | |
  | ||
  | 
  | 
  | 
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對離心條件進(jìn)行調(diào)整時,離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達(dá)到*分離效果,
離心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準(zhǔn)。
