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BCIP/NBT Kit（40×）

BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒（40×）

目錄號：K0051

保存條件：2-8℃保存。

組分說明

 本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

產(chǎn)品簡介

BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽＋NBT  (四

唑硝基藍(lán))是堿性磷酸酶（AP）理想的底物組合之一。在堿性磷酸酶的催化下，BCIP

會被水解而產(chǎn)生強反應(yīng)性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物與  NBT發(fā)生反應(yīng)，形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)

紫色化合物。該試劑盒可用于AP系統(tǒng)的IHC和Western  Blot實驗的酶促顯色。在AP催

化下，在組織切片或印跡膜上結(jié)合了  AP偶聯(lián)物的地方產(chǎn)生深藍(lán)色沉淀，可根據(jù)顏色反

應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達(dá)情況。

注意事項

1．工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，配制好的工作液1小時內(nèi)有效。

2．工作液用量必需充足，保證*覆蓋組織片或印跡膜。

3．為獲得理想實驗結(jié)果，請務(wù)必優(yōu)化實驗條件。

4．NBT有毒，使用時請采取必要的防護(hù)措施。

5．本產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體實驗或人體治療。

操作步驟

1．BCIP/NBT顯色工作液配制：

根據(jù)需要量，將40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT-顯色液以1：1：38的體積比混勻

后，即為BCIP/NBT顯色工作液。

2．顯色：

1）印跡膜顯色：將配制好的工作液滴加在印跡膜上（或?qū)⒂≯E膜傾入到BCIP/NBT

顯色工作液中），室溫避光孵育3-10分鐘。顯色完畢后，將膜浸入水中，終止反應(yīng)。

2）組織切片或細(xì)胞爬片顯色：滴加適量的BCIP/NBT顯色工作液于需要顯色的組織

切片或細(xì)胞爬片上，室溫避光孵育3-10分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時間，當(dāng)達(dá)到

理想顯色效果后，自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明，封片后

可長期保存。

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